分光光度计数据采集原理 1.1双光束分光光度计原理 分光光度计使用的基本原理是拉恩伯特-比尔定律,即溶液的吸光度Abs成正比溶液的吸收系数a、浓度C、液层厚度L。
即: 式中:T为透过率,Ia为入射光强度,I}为透射光强度。
每种物质都有特定的吸收光谱曲线。

通过测定待测物质在不同波长下的吸光度或透过率值,即可得到其吸收谱线。
通过与已知的谱线比较,可以识别该物质或测定该物质的浓度。
常用分光光度计的基本结构如图1所示,由光源、单色器、样品池、检测器、放大器和记录器6部分组成。
图1 分光光度计基本结构框图 双分光分光光度计的光路结构如图2所示。
钨丝灯和环境灯分别提供可见光和紫外光的连续光源。
单色仪将光束分成单色光,然后通过快速旋转的扇形旋转镜将光分成两部分,分别照射到样品池和参比池,从而消除了光源变化带来的误差(因此名称双光束光谱法)。
光度计),它使用同一探测器(光电倍增管PMT)交替接收透射的光强度信号。
1.2 分光光度计信号特性 信号处理过程如图3所示,样品池光束I和参比池光束Io通过旋转镜M交替射到光电倍增管上,输出信号为经运算放大器IC放大至-FL,然后通过与旋转镜M同步的开关so和si,将信号分离为i。
和我。
参考信号io与标准电压E之间的差值经运算放大器ICz放大,然后由PMT(倍增极)电压控制,使得i。
与E对齐。
在参考信号连续控制的PMT负电压下测量样品信号,可以消除电压和光源波动的影响,提高测量精度。
此时,样品信号i作为与样品池的透过率成正比的电压信号输出,或者也可以通过对数运算电路得到与吸光度值成正比的连续变化的模拟电压信号。
该电压信号的变化率主要由记录仪的波长扫描速度和走纸速度决定,是一个低频信号。
幅度为0-mV的模拟电压信号输出到记录仪,经放大后驱动跟踪电路,将电信号转换为记录笔的机械动作,绘制吸收(或透射)光谱曲线。
由上可见,分光光度计的输出信号是与被测参数线性相关的电压模拟信号,易于数字电路处理。
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